科研和臨床檢驗(yàn)場所PCR分子實(shí)驗(yàn)經(jīng)常被PCR假陽性問題所困擾,導(dǎo)致這一問題的主要元兇就是核酸氣溶膠污染。極微量的核酸氣溶膠污染, 即可形成假陽性。一旦形成氣溶膠污染,則可引起整個PCR實(shí)驗(yàn)室污染,甚至需要關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室。
核酸氣溶膠產(chǎn)生的主要途徑:(1)核酸提取時,離心機(jī)離心/震蕩混勻反應(yīng)液;(2)PCR體系配液時移液器反復(fù)吹吸/震蕩混勻反應(yīng)管;(3)PCR擴(kuò)增完成后開蓋;(4)吸打/震蕩高濃度質(zhì)粒。
除氣溶膠污染外,RNA酶(RNase)污染也是實(shí)驗(yàn)室中令人頭痛的事件之一,RNase無處不在,且不容易降解。當(dāng)科研人員提取RNA時總是著裝整齊,手套換了一副又一副,小心再小心,總還是避免不了RNA降解。
萬禾生物推出的核酸清除液(Nucleic Acid Scavenger)專門用于PCR實(shí)驗(yàn)室高效清除核酸氣溶膠污染和RNase污染
將核酸清除液和核酸(RNA、基因組DNA、質(zhì)粒)在室溫下孵育10 min,隨后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結(jié)果顯示萬禾核酸清除液能有效清除核酸污染。
將核酸清除液與RNase室溫孵育10 min,吸凈EP管中清除液,再加入總RNA,室溫孵育5 min。隨后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結(jié)果顯示萬禾核酸清除液能有效清除RNase污染。
]]>本產(chǎn)品采用醫(yī)療專用的聚氨脂海綿為原材料,具有吸液性強(qiáng)、柔軟潔凈、發(fā)塵量低等優(yōu)點(diǎn)。采樣拭子頭可折斷,使用方便。采用的物料對微生物無毒害,能大量地增加樣本的采集、釋放量,增強(qiáng)樣本送檢期間的保存效果。能夠常溫保存口腔拭子DNA長達(dá)12個月,其獲得的DNA可用來完成各種基因檢測及分析實(shí)驗(yàn),如qPCR、NGS、SNP分析。為運(yùn)輸和存儲提供方便,并減低其成本。產(chǎn)品特點(diǎn)● 輻射消毒,確保產(chǎn)品無菌?!?nbsp;采用國際通用的方便滅菌的紙塑包裝?!?nbsp;獨(dú)立密封包裝,使用方便,操作簡單??谇皇米硬蓸硬僮鞣椒?.取樣前清潔雙手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物殘?jiān)?,咽盡口腔中剩余的清水。2.撕開采樣棉簽外包裝。3.將棉簽伸進(jìn)口腔內(nèi),在內(nèi)側(cè)頰粘膜處反復(fù)擦拭20次以上,至棉頭已經(jīng)被唾液充分浸潤(應(yīng)無食物殘?jiān)犬愇镎掣剑?.打開樣本采集管蓋,將采樣后的棉簽放入樣本采集管內(nèi),沿手柄上的折痕折斷手柄。5.隨即蓋上樣本采集管,完成樣品取樣。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 采樣管符合多數(shù)離心機(jī)機(jī)型,可直接將采樣管插入離心機(jī)中離心,方便取樣。
2. 核酸無需提取,可直接作為模板。
3. 不含下游擴(kuò)增抑制性物質(zhì)。
4. 常溫保存運(yùn)輸,無需冷鏈運(yùn)輸。
5. 滅活病毒保證醫(yī)護(hù)人員安全
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
1.滅活型病毒保存液(直擴(kuò)型)擴(kuò)增效果
如圖1所示直擴(kuò)組(紅色)和核酸提取組(黑色)的qRT-PCR效果。分別設(shè)置4種稀釋梯度(下圖從左到右分別是10-3、10-4、10-5、10-6) 和兩個重復(fù)。直擴(kuò)組的CT值要略低于核酸提取組,但兩組的靈敏度完全一致。直擴(kuò)型病毒保存液對PCR沒有明顯抑制。
]]>本產(chǎn)品用于病毒樣本的采集保存、病毒滅活裂解以及核酸的釋放??捎糜诒茄适米?、口腔拭子等樣本類型進(jìn)行采集、運(yùn)輸和保存。本產(chǎn)品不含抑制下游擴(kuò)增的抑制劑,可直接作為核酸模板配套一步法核酸檢測試劑盒進(jìn)行使用,減少因核酸提取而導(dǎo)致的核酸模板的損失。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 滅活病毒保證醫(yī)護(hù)人員安全
2. 核酸無需提取,可直接作為模板。
3. 不含下游擴(kuò)增抑制性物質(zhì)。
4. 常溫保存運(yùn)輸,無需冷鏈運(yùn)輸。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
1.滅活型病毒保存液(直擴(kuò)型)擴(kuò)增效果
如圖1所示直擴(kuò)組(紅色)和核酸提取組(黑色)的qRT-PCR效果。分別設(shè)置4種稀釋梯度(下圖從左到右分別是10-3、10-4、10-5、10-6) 和兩個重復(fù)。直擴(kuò)組的CT值要略低于核酸提取組,但兩組的靈敏度完全一致。直擴(kuò)型病毒保存液對PCR沒有明顯抑制。
]]>本產(chǎn)品采用醫(yī)療專用的聚氨脂海綿為原材料,具有吸液性強(qiáng)、柔軟潔凈、發(fā)塵量低等優(yōu)點(diǎn)。采樣拭子頭可折斷,使用方便。采用的物料對微生物無毒害,能大量地增加樣本的采集、釋放量,增強(qiáng)樣本送檢期間的保存效果。能夠常溫保存口腔拭子DNA長達(dá)12個月,其獲得的DNA可用來完成各種基因檢測及分析實(shí)驗(yàn),如qPCR、NGS、SNP分析。為運(yùn)輸和存儲提供方便,并減低其成本。?口腔拭子采樣操作方法1.取樣前清潔雙手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物殘?jiān)?,咽盡口腔中剩余的清水。2.撕開采樣棉簽外包裝。3.將棉簽伸進(jìn)口腔內(nèi),在內(nèi)側(cè)頰粘膜處反復(fù)擦拭20次以上,至棉頭已經(jīng)被唾液充分浸潤(應(yīng)無食物殘?jiān)犬愇镎掣剑?.打開樣本采集管蓋,將采樣后的棉簽放入樣本采集管內(nèi),沿手柄上的折痕折斷手柄。5.隨即蓋上樣本采集管,完成樣品取樣。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.即時滅活,降低風(fēng)險(xiǎn),保障人員安全。
2.中性無毒,保護(hù)操作人員。
3.內(nèi)含RNase酶抑制劑,保護(hù)病毒核酸穩(wěn)定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
4.無縫銜接核酸提取,操作更加便捷
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
1.滅活型保存液病毒保存效果比較 本實(shí)驗(yàn)對比了2種滅活型保存液(胍鹽型與脲型)保存COVID-19假病毒的效果,保存條件為室溫保存7天。如表所示,2種保存液分別作了三個梯度的稀釋。如圖1所示,三個梯度CT值十分接近,以上結(jié)果說明胍鹽型與脲型滅活型保存液在室溫下7天下保存病毒的效果一致。
2. 輻照滅菌對滅活型保存液滅活病毒效果的影響
如圖所示,雞胚接種滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)處理后的雞傳染性支氣管炎病毒(QXL87,濃度105 copies/mL),雞胚生長正常;接種加入病毒的生理鹽水,雞胚病變。這些結(jié)果表滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
在雞胚中分別接種滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)以及生理鹽水處理后的病毒,收集尿囊液進(jìn)行RT-qPCR檢測。如圖所示,滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)處理的病毒的尿囊液中,無法檢測到病毒的存在;接種生理鹽水處理的病毒的尿囊液中,病毒核酸呈陽性。以上結(jié)果進(jìn)一步說明滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
在IPEC-J2細(xì)胞中分別接種滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)以及非滅活病毒保存液、生理鹽水處理后的病毒。如圖所示,滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)處理的病毒的細(xì)胞,無法檢測到病毒的存在,細(xì)胞完全失活;接種生理鹽水及非滅活保存液處理的病毒的細(xì)胞中,細(xì)胞正常生長。以上結(jié)果更充分說明滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
]]>本產(chǎn)品由異硫氰酸胍和尿素等變性劑組成,可迅速裂解細(xì)胞,使病毒變性并釋放病毒核酸,抑制核酸酶活性,可有效保護(hù)核酸。是一種能快速滅活病毒的通用采樣產(chǎn)品。適用于人鼻、咽拭子等樣本的病毒核酸保存。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.即時滅活,降低風(fēng)險(xiǎn),保障人員安全。
2.中性無毒,保護(hù)操作人員。
3.內(nèi)含RNase酶抑制劑,保護(hù)病毒核酸穩(wěn)定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
4.無縫銜接核酸提取,操作更加便捷
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
1.滅活型保存液病毒保存效果比較
本實(shí)驗(yàn)對比了2種滅活型保存液(胍鹽型與脲型)保存COVID-19假病毒的效果,保存條件為室溫保存7天。如表4所示,2種保存液分別作了三個梯度的稀釋。如圖1所示,三個梯度CT值十分接近,以上結(jié)果說明胍鹽型與脲型滅活型保存液在室溫下7天下保存病毒的效果一致。
2. 輻照滅菌對滅活型保存液滅活病毒效果的影響
如圖所示,雞胚接種滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)處理后的雞傳染性支氣管炎病毒(QXL87,濃度105 copies/mL),雞胚生長正常;接種加入病毒的生理鹽水,雞胚病變。這些結(jié)果表滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
在雞胚中分別接種滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)以及生理鹽水處理后的病毒,收集尿囊液進(jìn)行RT-qPCR檢測。如圖所示,滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)處理的病毒的尿囊液中,無法檢測到病毒的存在;接種生理鹽水處理的病毒的尿囊液中,病毒核酸呈陽性。以上結(jié)果進(jìn)一步說明滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
滅活型保存液(胍鹽型)以及滅活型保存液(脲型)能有效的滅活病毒。
]]>本產(chǎn)品采用醫(yī)療專用的聚氨脂海綿為原材料,具有吸液性強(qiáng)、柔軟潔凈、發(fā)塵量低等優(yōu)點(diǎn)。采樣拭子頭可折斷,使用方便。采用的物料對微生物無毒害,能大量地增加樣本的采集、釋放量,增強(qiáng)樣本送檢期間的保存效果。能夠常溫保存口腔拭子DNA長達(dá)12個月,其獲得的DNA可用來完成各種基因檢測及分析實(shí)驗(yàn),如qPCR、NGS、SNP分析。為運(yùn)輸和存儲提供方便,并減低其成本。產(chǎn)品特點(diǎn)●?輻射消毒,確保產(chǎn)品無菌?!?采用國際通用的方便滅菌的紙塑包裝?!?獨(dú)立密封包裝,使用方便,操作簡單。口腔拭子采樣操作方法1.取樣前清潔雙手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物殘?jiān)?,咽盡口腔中剩余的清水。2.撕開采樣棉簽外包裝。3.將棉簽伸進(jìn)口腔內(nèi),在內(nèi)側(cè)頰粘膜處反復(fù)擦拭20次以上,至棉頭已經(jīng)被唾液充分浸潤(應(yīng)無食物殘?jiān)犬愇镎掣剑?.打開樣本采集管蓋,將采樣后的棉簽放入樣本采集管內(nèi),沿手柄上的折痕折斷手柄。5.隨即蓋上樣本采集管,完成樣品取樣。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.添加抗生素及新型抗菌劑,可對溶液進(jìn)行輻照,有效防止細(xì)菌真菌污染變質(zhì)。
2.無拭子樣品限制,適用于各種拭子。
3.不含裂解成分,保持病毒活性,不破壞病毒外殼,適合長途運(yùn)輸。
4.簡潔方便,適合柱式及磁珠核酸提取。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
非滅活型保存液病毒保存效果比較
本實(shí)驗(yàn)對比了4種非滅活型保存液常溫下72h保存IBV病毒的效果,病毒濃度為106 copies/mL。如圖1所示,COPAN病毒保存液的CT值最?。?0.63);非滅活無菌型保存液1(培養(yǎng)型)與非無菌型保存液1(通用型)的CT值接近,分別為23.81與24.07;友康病毒保存液的CT值略低,為22.90。如表2所述,COPAN病毒保存液體積小,所以病毒濃度高,導(dǎo)致CT值偏低。另3種病毒保存液體積一致,病毒濃度相同,CT值也十分接近,說明非滅活型保存液在室溫保存病毒72h后擴(kuò)增效果無影響。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
非滅活無菌型保存液1(培養(yǎng)型)、非無菌型保存液1(通用型)保存病毒的效果與國內(nèi)外類似產(chǎn)品的效果一致。
]]>病毒保存液(非滅活、培養(yǎng)型)是在Hank’s的基礎(chǔ)上添加了病毒所需要的營養(yǎng)成分,如:氨基酸,維生素等。同時還添加抗生素及抑菌劑防止保存液生菌變質(zhì),可維持病毒的活性,保持病毒樣本的原始性。不含裂解成分,可用于后期病毒的提取檢測、病毒的培養(yǎng)和分離。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.添加抗生素及新型抗菌劑,可對溶液進(jìn)行輻照,有效防止細(xì)菌真菌污染變質(zhì)。
2.無拭子樣品限制,適用于各種拭子。
3.不含裂解成分,保持病毒活性,不破壞病毒外殼,適合長途運(yùn)輸。
4.簡潔方便,適合柱式及磁珠核酸提取。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
非滅活型保存液病毒保存效果比較
本實(shí)驗(yàn)對比了4種非滅活型保存液常溫下72h保存IBV病毒的效果,病毒濃度為106 copies/mL。如圖1所示,COPAN病毒保存液的CT值最小(20.63);非滅活無菌型保存液1(培養(yǎng)型)與非無菌型保存液1(通用型)的CT值接近,分別為23.81與24.07;友康病毒保存液的CT值略低,為22.90。如表2所述,COPAN病毒保存液體積小,所以病毒濃度高,導(dǎo)致CT值偏低。另3種病毒保存液體積一致,病毒濃度相同,CT值也十分接近,說明非滅活型保存液在室溫保存病毒72h后擴(kuò)增效果無影響。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
非滅活無菌型保存液1(培養(yǎng)型)、非無菌型保存液1(通用型)保存病毒的效果與國內(nèi)外類似產(chǎn)品的效果一致。
]]>唾液中含有豐富的DNA,是樣品采集的優(yōu)質(zhì)來源。唾液DNA樣本采集與常規(guī)血液DNA樣本采集相比,血液采集會對被采集血液者帶疼痛和傷害,尤其是小孩子采集血液時會害怕甚至是拒絕。唾液樣品采集是一種對人體無傷害、無痛苦的獲取DNA的方法。本保存液用于室溫下收集唾液DNA,方便運(yùn)輸和儲存。保證唾液DNA無降解,為下游的基因檢測提供高質(zhì)量的DNA樣品。
產(chǎn)品特點(diǎn)
簡單:操作簡單安全。
方便:樣品穩(wěn)定,常溫保存,保存時間長達(dá)數(shù)年,不需要冷凍,方便運(yùn)輸,減少制冷成本。
高效:獲得質(zhì)量更好的DNA/RNA。產(chǎn)量高,可代替血液DNA來完成各種基因測試。如:qpcr、NGS、SNP分析。
安全:能抑制細(xì)菌病毒生長,并殺滅傳染的細(xì)菌及病毒,口頭收集樣品,減少感染機(jī)會,避免了醫(yī)護(hù)人員處理樣本時感染的危險(xiǎn)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
本公司唾液保存液47℃溫度下保存唾液0-7天后qPCR擴(kuò)增曲線圖。生物學(xué)重復(fù)1(黑線)、生物學(xué)重復(fù)2(紅線)、陰性對照(藍(lán)線)。每個生物學(xué)重復(fù)分別設(shè)置了兩個技術(shù)重復(fù)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
唾液保存液可在室溫下(47℃以下)7天內(nèi)保存唾液中的DNA不降解。
]]>大部分基因的研究測試都始于DNA的采集,而傳統(tǒng)的血液樣品采集方法操作復(fù)雜,成本較高,新鮮血液需要在低溫下保存,造成運(yùn)輸攜帶不方便,并且這種采血方法對被收集者造成傷害,帶來痛苦,被絕大多數(shù)人所厭惡、甚至拒絕。而唾液中含有豐富的DNA,是樣品采集的優(yōu)質(zhì)來源。唾液DNA樣本采集與常規(guī)血液DNA樣本采集相比,唾液樣品采集是一種對人體無傷害、無痛苦的獲取DNA的方法。該法不會對被收集者造成任何不適,容易被接受,因而能最大限度的擴(kuò)大基因研究的取樣范圍,特別適合分子流行病學(xué)大人群調(diào)查。常溫下唾液DNA樣本可以保存多年、綠色環(huán)保、攜帶方便。本產(chǎn)品包含唾液采樣盒和唾液DNA樣本保存管,可穩(wěn)定保存唾液DNA樣本。唾液DNA樣本保存管中含有1 ml的唾液DNA保存液,能迅速抑制唾液中的核酸酶,穩(wěn)定唾液DNA。常溫下,唾液DNA樣本保存管中的DNA樣本的儲存和運(yùn)輸?shù)臅r間長達(dá)兩年。提取的DNA適用于下游多種基因檢測,如PCR、芯片分析及二代測序等。
產(chǎn)品特點(diǎn)
簡單:操作簡單安全,只需將唾液輕輕一吐,便可得到樣品。
方便:樣品穩(wěn)定,常溫保存,保存時間長達(dá)數(shù)年,不需要冷凍,方便運(yùn)輸,減少制冷成本。
高效:獲得質(zhì)量更好的DNA/RNA。產(chǎn)量高,可代替血液DNA來完成各種基因測試。如:qpcr、NGS、SNP分析。
安全:能抑制細(xì)菌病毒生長,并殺滅傳染的細(xì)菌及病毒,口頭收集樣品,減少感染機(jī)會,避免了醫(yī)護(hù)人員處理樣本時感染的危險(xiǎn)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
本公司唾液保存液在47℃環(huán)境下保存唾液0-7天后qPCR檢測數(shù)據(jù)(CT值)
本公司唾液保存液47℃溫度下保存唾液0-7天后qPCR擴(kuò)增曲線圖。生物學(xué)重復(fù)1(黑線)、生物學(xué)重復(fù)2(紅線)、陰性對照(藍(lán)線)。每個生物學(xué)重復(fù)分別設(shè)置了兩個技術(shù)重復(fù)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
唾液保存液可在室溫下(47℃以下)7天內(nèi)保存唾液中的DNA不降解。
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