科研和臨床檢驗場所PCR分子實驗經(jīng)常被PCR假陽性問題所困擾,導(dǎo)致這一問題的主要元兇就是核酸氣溶膠污染。極微量的核酸氣溶膠污染, 即可形成假陽性。一旦形成氣溶膠污染,則可引起整個PCR實驗室污染,甚至需要關(guān)閉實驗室。
核酸氣溶膠產(chǎn)生的主要途徑:(1)核酸提取時,離心機離心/震蕩混勻反應(yīng)液;(2)PCR體系配液時移液器反復(fù)吹吸/震蕩混勻反應(yīng)管;(3)PCR擴增完成后開蓋;(4)吸打/震蕩高濃度質(zhì)粒。
除氣溶膠污染外,RNA酶(RNase)污染也是實驗室中令人頭痛的事件之一,RNase無處不在,且不容易降解。當(dāng)科研人員提取RNA時總是著裝整齊,手套換了一副又一副,小心再小心,總還是避免不了RNA降解。
萬禾生物推出的核酸清除液(Nucleic Acid Scavenger)專門用于PCR實驗室高效清除核酸氣溶膠污染和RNase污染
將核酸清除液和核酸(RNA、基因組DNA、質(zhì)粒)在室溫下孵育10 min,隨后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結(jié)果顯示萬禾核酸清除液能有效清除核酸污染。
將核酸清除液與RNase室溫孵育10 min,吸凈EP管中清除液,再加入總RNA,室溫孵育5 min。隨后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結(jié)果顯示萬禾核酸清除液能有效清除RNase污染。
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